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***印迹技术服务(western blot)
***印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(western blot),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相***测定技术基础上发展起来的一种新的***生化技术。由于***印迹(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相***测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。***印迹(western blot)常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
闪晶生物为您提供全套***印迹(western blot)技术服务和相关的试剂耗材。主要实验步骤如下:
2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。
3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染蛋白marker分别上样,标准加进个孔中,电泳分离蛋白。
4. 蛋白质转移到PVDF膜,按Bio-Rad蛋白转移装置说明组装滤纸凝胶纤维素夹层,30mA恒流条件下,4°C转移过夜。
5. western blot膜的封闭和抗体孵育
6. western blot结果检测:化学发光法检测,膜与化学发光底物孵育,经X胶片曝光显影。图片扫描保存为电脑文件,并用GIS1000分析软件将图片上每个特异条带灰度值的数字化。
7. western blot数据分析:目的蛋白的灰度值除以内参GAPDF的灰度值以校正误差,所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量。
8. 提供实验报告,包括详细的实验方法及***印迹实验结果的相关数据。
更详细的操作说明 Western Blot操作规程
western blot费用:每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。每张膜的费用是:1500.00元。一抗另计,其它试剂免费,一抗订购时间约为3周。乘车路线:火车站坐1号地铁到终点站,然后换5号地铁坐到北桥站即可。
时间:约2-3周。
联系:master@shinegene.org.cn shinegene@vip.163.com 电话:021-54460831-11 罗珍
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